綜合微生物的培養(yǎng)方法,包括以下步驟:
(1)前期準(zhǔn)備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設(shè)備和材料;
(2)按比例配制培養(yǎng)材料;
(3)導(dǎo)入曝氣,進行繁殖培養(yǎng);
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養(yǎng);
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養(yǎng)方法簡單可操作性強,培養(yǎng)的綜合微生物均在3代以內(nèi),菌類穩(wěn)定不發(fā)生突變,且繁殖快速。
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規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
門多薩假單胞菌規(guī)格 | Pseudomona | EY-J963706 |
資源名稱: 門多薩假單胞菌
種屬: Pseudomonas mendocina
提供形式: 凍干物
安全等級: 1
模式菌株: yes
應(yīng)用領(lǐng)域: 研究、質(zhì)量控制
培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂:蛋白胨 10.0g,牛肉浸取物 3.0g,NaCl 5.0g,瓊脂 15.0g,蒸餾水 1.0L,pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿菌時加入5mg MnSO4·H2O,則有利于產(chǎn)生芽孢。121℃,15min。
生長條件: 30℃,好氧
存儲條件: 真空冷凍干燥法
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達(dá)3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內(nèi),然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
Vibrio│neocaledonicus 中文名稱:新喀里多尼亞弧菌Vibrio│neocaledonicus分離基物:硫化物/TVG硫化物提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:生物活性微生物/產(chǎn)嗜鐵素培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Pseudomonas│kunmingensis 中文名稱:昆明假單胞菌Pseudomonas│kunmingensis分離基物:樣/深層海提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:有機物降解菌/可降解乙醛(已單菌驗證)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Halomonas│axialensis 中文名稱:軸向海山鹽單胞菌Halomonas│axialensis分離基物:樣/深層海提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:有機物降解菌/可降解乙醛(已單菌驗證)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Vibrio│rotiferianus 中文名稱:輪蟲弧菌Vibrio│rotiferianus分離基物:樣/深層海提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:有機物降解菌/可降解乙醛(已單菌驗證)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Pseudoalromonas│shioyasakiensis 中文名稱:假交替單胞菌(加詞待譯)Pseudoalromonas│shioyasakiensis分離基物:沉積物/TVMC沉積物提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:有機物降解菌/可降解乙醛(已單菌驗證)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97%
Psychrobacr│pulmonis 中文名稱:肺嗜冷桿菌Psychrobacr│pulmonis分離基物:沉積物/TVMC沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:有機物降解菌/可降解乙醛(已單菌驗證)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Psychrobacr│marincola 中文名稱:居海嗜冷桿菌Psychrobacr│marincola分離基物:沉積物/TVMC沉積物提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:有機物降解菌/可降解乙醛(已單菌驗證)培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
Planomicrobium│okeanokois 中文名稱:海床動性微菌Planomicrobium│okeanokois分離基物:沉積物/TVMC沉積物提供形式:凍干物安全等級:2模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:潛在的有機污染物降解菌/分離自甲醇富集菌群培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長條件:28℃存儲條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98%
門多薩假單胞菌規(guī)格Phospho-TBK1/NAK (Ser172) NF-κB活化激酶抗體磷化A-Raf抗體L-蛋氨甲酯鹽鹽Mouse CFD (Complement Factor D) ELISA Kit
Tat 細(xì)胞酪氨轉(zhuǎn)氨酶抗體紅細(xì)胞腺苷脫氨酶3抗體2-溴-3'-羥基苯乙Mouse CFH (Complement Factor H) ELISA Kit
Tau protein 微管相關(guān)蛋白抗體雄激素結(jié)合蛋白抗體(R)-(-)-3-羥基丁乙酯Mouse C3a (Complement Component 3a) ELISA Kit
TRH 促甲狀腺素釋放激素抗體肝再生增強因子抗體(R)-(-)-3-羥基丁乙酯Mouse C4a (Complement Component 4a) ELISA Kit
Tau protein 微管相關(guān)蛋白抗體APP/ABPP淀樣肽前體蛋白抗體3-環(huán)基-3-氧代乙酯Mouse C5a (Complement Component 5a) ELISA Kit
phospho-Tau protein (Thr489) 磷化微管相關(guān)蛋白抗體甲胎蛋白單克隆抗體(包被)3-環(huán)基-3-氧代乙酯Mouse CTGF (Connective Tissue Growth Factor) ELISA Kit
phospho-Tau protein (Ser396) 磷化微管相關(guān)蛋白抗體甲胎蛋白單克隆抗體(檢測)4-溴苯異酯Mouse CX26 (Connexin 26) ELISA Kit
phospho-Tau protein (Ser422) 磷化微管相關(guān)蛋白抗體ADP核糖基化因子結(jié)合蛋白1抗體4-溴苯異酯Mouse CX31 (Connexin 31) ELISA Kit