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產(chǎn)品展示   ProductsATCC細胞>>轉(zhuǎn)化細胞>>類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN
 
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產(chǎn)品名稱:
類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN
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  類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN的詳細資料:

公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學(xué)研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:

產(chǎn)品名稱

生長特性

貨號

類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN

貼壁生長

EY-X63694

細胞名稱  類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN
形態(tài)特性: 成纖維細胞樣

生長特性: 貼壁生長

特征特性: 該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。

培養(yǎng)條件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS

傳代方法: 1:3傳代,3-4天傳1次

傳代情況: C6

凍存條件: 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS

支原體檢測: 陰性
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冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
Liriodenine

CAS No.:475-75-2

中文名:鵝掌楸

分子式:C17H9NO3

胞膽 訂購|咨詢  脂質(zhì)運載蛋白1(L1) 規(guī)格: 50mg

訂購|咨詢  脂質(zhì)運載蛋白1(L1) 規(guī)格: 500mg

 訂購|咨詢  脂質(zhì)運載蛋白10(L10) 規(guī)格: 100mg

促卵泡生成素(FSH) 訂購|咨詢  脂質(zhì)運載蛋白12(L12) 規(guī)格: 3支/套,0.5ml/支

長春 訂購|咨詢  脂質(zhì)運載蛋白15(L15) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

喜樹 訂購|咨詢  脂質(zhì)運載蛋白6(L6) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

絡(luò)塞定 訂購|咨詢  脂質(zhì)運載蛋白8(L8) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

異綠原B;3,4二??鼘?訂購|咨詢  脂質(zhì)運載蛋白9(L9) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

長春質(zhì) 訂購|咨詢  脂質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白(CETP) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

柚皮素 訂購|咨詢  脂質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白(CETP) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

洋川芎內(nèi)酯A 訂購|咨詢  脂肪分相關(guān)蛋白(ADRP) 規(guī)格: HPLC≥98%,50mg/支

細辛脂素 訂購|咨詢  脂肪細胞型脂肪結(jié)合蛋白(FABP4) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支;

哈巴苷; 哈帕苷; 哈帕甙; 瓜鉤草苷 訂購|咨詢  脂肪細胞型脂肪結(jié)合蛋白(FABP4) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

葒草苷; 葒草素 訂購|咨詢  脂肪細胞型脂肪結(jié)合蛋白(FABP4) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

司巴 訂購|咨詢  脂肪細胞膜關(guān)聯(lián)蛋白(APMAP) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

5O基維斯阿米苷 訂購|咨詢  脂肪酶H(LIPH) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

防己諾林;漢防已素 訂購|咨詢  脂肪酶I(LIPI) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

松蘿; 松羅 訂購|咨詢  脂肪酶J(LIPJ) 規(guī)格: HPLC≥98%,20mg/支

phosphoANAPC1(Ser377)  細胞周期末期促進復(fù)合蛋白APC1抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Vardenafil hydrochloride trihydrate

Agrin  聚集蛋白抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml Bestatin,Ubenimex

CENPT  著絲粒蛋白T抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Bestatin,Ubenimex

RanGAP1  RAN GTPase酶激活蛋白1抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml (3,4Dimethoxyphenyl)acetic acid

PRC1  胞質(zhì)分裂調(diào)控蛋白1抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.1ml PD0325901

CDCREL/SEPT5  細胞周期調(diào)控相關(guān)蛋白1    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sitaxsentan sodium; TBC11249; Thelin

SEPT6  細胞分蛋白SEPT6抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sitaxsentan sodium; TBC11250; Thelin

Septin 8  細胞分蛋白SEPT8抗體    現(xiàn)貨供應(yīng) 0.2ml Sitaxsentan sodium; TBC11251; Thelin

性橙II  進口、國產(chǎn)  英文名稱:OrangeⅡ  含量:BR,99%

性蛋白酶  進口、國產(chǎn)  英文名稱:AcidicProtease  含量:生物技術(shù)級,1u/mg

性鉻蘭K  進口、國產(chǎn)  英文名稱:ChromeBlueK  含量:FMP,35%

性黑2  進口、國產(chǎn)  英文名稱:Nigrosinewatersoluble  含量:高純,99%

性紅101  進口、國產(chǎn)  英文名稱:AzocarmineG  含量:BR

性紅27  進口、國產(chǎn)  英文名稱:Amaranth  含量:高純,95%

性紅92  進口、國產(chǎn)  英文名稱:PhloxineB  含量:超純

性藍147  進口、國產(chǎn)  英文名稱:XylenecyanoleFF  含量:BR,99%

性藍1  進口、國產(chǎn)  英文名稱:Xyleneblue  含量:特純,98%

性鈣  進口、國產(chǎn)  英文名稱:Acidcalciumphosphate  含量:CP
類成纖維細胞系;CNLMG-B5537SKIN副結(jié)核陽性血清規(guī)格:4ml用途:檢驗

硝鹽胨水培養(yǎng)基規(guī)格:BR250g詳情介紹

AHM鑒別培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于致病性嗜水氣單胞菌的鑒別

大腸桿菌生化鑒定條(GB)規(guī)格:4種*2*5條用途:用于大腸桿菌的生化鑒定

鐵細菌培養(yǎng)基規(guī)格:250g用途:用于鐵細菌的分離培養(yǎng)

大豆酪蛋白消化物培養(yǎng)基(USP)顆粒規(guī)格:250g用途:用于藥品的無菌檢測
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量 源葉生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的  *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。

 

產(chǎn)品相關(guān)關(guān)鍵字: 類成纖維細胞系 CNLMG-B5537SKIN
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