實驗要點及說明:
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率;
5.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
公司細胞廣泛用于國內(nèi)院校的細胞生物學研究,作為實驗項目研究。下列產(chǎn)品詳細介紹:
產(chǎn)品名稱 | 生長特性 | 貨號 |
結直腸腺癌細胞;NCI-H716[H716] | 貼壁生長 | EY-X63940 |
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細胞名稱 結直腸腺癌細胞;NCI-H716[H716]
形態(tài)特性: 上皮細胞
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 從一位經(jīng)5-氟治療的患者腹水中得到的細胞建立了這個細胞株。與其它結直腸癌細胞系不同,這株細胞有多巴脫羧酶,細胞質中有核心致密的內(nèi)分泌型顆粒。這株細胞不表達TAG-72或CA19-9抗原,也不生成癌胚抗原(CEA)。
培養(yǎng)條件: RPMI1640(w/oHepes)優(yōu)質胎牛血清,10%
傳代方法: 消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況: PN5
凍存條件: 基礎培養(yǎng)基+8%DMSO+20%FBS
支原體檢測: 陰性
冷凍保存細胞之方法
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將成1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作步驟:
1、貼壁細胞的消化
①吸除培養(yǎng)液,用無菌 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細胞一次,以去除殘余的血清。
②加入少量生物 Trypsin-EDTA solution,略蓋過細胞即可,室溫放置 0.5~2min, 不同的細胞消化時間有所不同。
③顯微鏡下觀察,細胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變
化;或者用槍吹打細胞發(fā)現(xiàn)細胞剛好可以被吹打下來,吸除細胞消化液。加入含血清的 *細胞培養(yǎng)液,吹打下細胞,即可直接用于后續(xù)實驗。
④如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入 Trypsin-EDTA solution 重新消化。
⑤如果發(fā)現(xiàn)細胞消化時間過長,未及吹打細胞,細胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落, 直接用細胞培養(yǎng)液把細胞全部吹打下來。1000~2000g 離心 1min,沉淀細胞,盡量去除細胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細胞,即可用于后續(xù)實驗。
2、組織的消化不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
羽狀斑駁病檢測試劑盒
Reinking3-氨基苯酸Human STXBP4 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;Anti-HBx KY01拉丁屬名: Streptomyces griseoruber5-溴戊酸Human STK24 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;8D8拉丁屬名: Ralstonia pickettii5-溴戊酸Human STK25 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;AC10364拉丁屬名: Bacillus pumilus5-溴戊酸Human STK31(Serine/threonine-protein kinase 31) ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;7G6用途: 固氮。鹽酸苯甲脒,水合物Human STK3 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;3G10拉丁屬名: Bacillus cereus鹽酸苯甲脒,水合物Human STK32A ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;4E3注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用鹽酸苯甲脒,水合物Human STK32C ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;11B10拉丁屬名: Botryosphaeria ribis Grossenb. 尿素-15N2Human STK32B ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;1E4拉丁屬名: Corynebacterium glutamicum尿素-15N2Human STK33 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;IE1注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用1-甲基-4-哌啶甲Human STK33 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;8G3-B5-SP20用途: 食用1-甲基-4-哌啶甲Human STK32B ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;8D6拉丁屬名: Alternaria sp. 1-甲基-4-哌啶甲Human STK32C ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;CR-M01注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(R)-(-)-扁桃酸甲酯Human STEAP3 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;W5注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用(R)-(-)-扁桃酸甲酯Human STK36 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;14853-1hz-5/C377拉丁屬名: Grimontia hollisae苯并(k)熒蒽Human STIM1 ELISA Kit
小鼠雜交瘤株;HE4-2B8注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治
VSIG4-11形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣ProtoⅨ
鎂原卟啉檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;3A2形態(tài)特性: 淋巴母細胞樣Mg-protoporphyrin
原脫植基葉綠素檢測試劑盒細胞名稱: 雜交瘤細胞株;8-F3(IgG1)形態(tài)特性: 上皮樣protochlorophyllide
結直腸腺癌細胞;NCI-H716[H716]新芒果苷64809-67-2中文別名:新杧果苷
英文名:Neomangiferin
CAS登錄號:64809-67-2
分子式:C25H28016
分子量:584.14
分子結構:
外觀:淡黃色粉末
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。
提取來源:漆樹科植物芒果Mangifera indica Linn.果實、葉、樹皮
溶解性:溶于及55%乙醇,微溶于和,不溶于、及等。
熔點:230℃(分解)
藥理藥效:芒果苷具有抗氧化、抗細菌、抗病、免疫調節(jié)及抗腫瘤等多方面的生理活性和藥理作用。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年