產品及特點:
熒光定量PCR是在PCR體系中加入熒光化合物(熒光染料或熒光探針)。利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程,使每個循環(huán)變得“可見”。本產品就是以探針法熒光定量 RT-PCR 技術為基礎開發(fā)的專門檢測鮑皰疹樣病毒探針法熒光定量PCR試劑盒的試劑盒。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
鸚鵡熱衣原體探針法PCR熒光定量試劑盒 | Chlamydia psittaci | EY00P8810 |
運輸及保存: 低溫運輸,-20℃保存,保存期限為12個月。
自備試劑:樣品 RNA。
分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費。
客戶只需提供樣品和待檢測基因名稱即可。由我們提取RNA,設計并合成引物,完成熒光定量PCR實驗以及后續(xù)數據分析,提供實驗報告給您。
染料法
探針法
可進行相對,定量表達分析,定性分析,SNP檢測等
實驗報告
電泳圖 ·標準曲線
溶解曲線 ·擴增曲線
完整的實驗過程、試劑、儀器及分析報告
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使用方法
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供無傳染性的 DNA 段作為陽性對照。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 RT-PCR 模板稀釋液,用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 RNA 的制備
7. 如果有N個樣品,設置N+2個提取,多出的一個是PC(樣品制備陽性對照),一個是 NC(樣品制備陰性對照)。可以用10μL陽性對照的10000倍稀釋液再加上一定量的水使總體積跟每次制備要求的體積一樣,以此作為PC。另外用水作為NC。
8. 用自選方法純化樣品的RNA,本試劑盒跟市場上大多數病毒RNA提取試劑盒兼容。也以選購本公司的柱式病毒RNAout。本試劑盒免費贈送20次免RNA提取的核酸釋放劑試用裝,該釋放劑的裂解液可以直接作為RT-PCR模板,省略了RNA提取步驟。
三、Probe qRT-PCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做1次重復,則標記N+9個PCR 管,其中N+2個用于上步得到的 N+2個樣品,1個用于PCR陰性對照(用水做模板),6個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做1次重復,則標記N+4 個PCR管,其中N+2個用于上步得到的N+2個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1個用于PCR陽性對照(用第4號管的陽性對照稀釋液做模板)。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標記管中按下表加入各成分(本表只列出一次重復。樣品管和陰性對照設置完畢后才設置陽性對照,并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好后加)
N,N’-二-(2-辛基十二烷基)-2,3,6,7-四溴-1,4,5,8-萘四羧酸二酰溴酚藍 Bromophenol Blue Molecular sieves Type 13X
3-叔丁氧羰基氨基-1-哌啶甲酸叔丁酯溴酚藍 Bromophenol Blue Molecular sieves, 3 Å
9,10-二基蒽2-溴* 2-Bromophenol >98.0%(GC&T) Molecular sieves, 3 Å
對氯甲酸叔丁酯2-溴* 2-Bromophenol >98.0%(GC&T) Molecular sieves, 3 Å
4-辛氧基苯酸3-溴* 3-Bromophenol >95.0%(GC) Molecular sieves, 3 Å
5-溴-3-(三氟甲基)-2-基吡啶3-溴* 3-Bromophenol >95.0%(GC) Molecular sieves, 3 Å
1-BOC-哌-2-甲酸1-溴戊烷 1-Bromopentane >98.0%(GC) Molecular sieves, 3 Å
氧化型*1-溴戊烷 1-Bromopentane >98.0%(GC) Molecular sieves, 3 Å
[1,3-雙[2,6-二異基苯基]-2-咪唑烷亞基]二氯[[2-(異氧基)-5-[(2,2,2-烯基溴 Allyl Bromide >98.0%(GC) Molecular sieves, 4 Å
3-(噻吩-2-基)-1H-吡唑-5-羧酸乙酯溴酮(含穩(wěn)定劑氧化鎂) Bromoacetone (stabilized with MgO)>90.0%(GC) Molecular sieves, 4 Å
2-溴-3,5-二氯苯溴酮(含穩(wěn)定劑氧化鎂) Bromoacetone (stabilized with MgO)>90.0%(GC) Molecular sieves, 4 Å
N-乙酰-5'-O-[二(4-甲氧基苯基)苯甲基]-2'-O-[(1,1-二甲基乙基)二甲基硅]-胞3-溴-1- 3-Bromo-1-propanol >93.0%(GC) Molecular sieves, 4 Å
二羰基環(huán)戊二烯鈷3-溴-1- 3-Bromo-1-propanol >93.0%(GC) Molecular sieves, 4 Å
4'-甲基-[1,1'-聯(lián)苯]-4-1-溴-2-(含約20%的2-溴-1-)(含穩(wěn)定劑氧化鎂) 1-Bromo-2-propanol (contains ca. 20% 2-Bromo-1-propanol)(stabilized with MgO)>79.0%(GC) Molecular sieves, 4 Å
3-苯基苯甲2-溴烷 2-Bromopropane >99.0%(GC) Molecular sieves, 5 Å
鸚鵡熱衣原體探針法PCR熒光定量試劑盒胸腺嘧啶核苷磷酸化酶(TP)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)* 質量規(guī)格:干品Cefquinome>80%,BR100ml
Slit同源物2(Slit2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)* 質量規(guī)格:>98%,BR,可用于細胞培養(yǎng)100ml
Slit同源物2(Slit2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)* 質量規(guī)格:含量測定6次/盒
粘蛋白5AC(MUC5AC)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽酸* 質量規(guī)格:>97%,分子生物學級500 ml
載脂蛋白A2(APOA2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)鹽酸* 質量規(guī)格:>99%,BR1ml(500X)
載脂蛋白B(APOB)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)苯磺酸*(絡活喜、安洛地) 質量規(guī)格:HPLC>99%,標準品500 ml
多巴受體D2(DRD2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)苯磺酸*(絡活喜、安洛地) 質量規(guī)格:>97%3×1ml
多巴受體D2(DRD2)(酶聯(lián)免疫吸附試驗法)苯磺酸*(絡活喜、安洛地) 質量規(guī)格:>96%,*6次/盒