胱抑素CElisa試劑盒不正確的洗滌及解決方法
在做血清胱抑素CElisa試劑盒實驗時,重復(fù)了很多次,結(jié)果每次結(jié)果的背景值都很高,OD值達(dá)到0.6,很頭疼,嘗試過用封閉液稀釋抗體和血清,也嘗試過重重拍板拍干,結(jié)果均無濟(jì)于事!希望我司技術(shù)幫忙解決。根據(jù)我們的技術(shù)探討得出以下幾點:
ELISA試劑盒不正確的洗滌:洗滌不充分或漏洗都有會導(dǎo)致背景高。核對ELISA洗液的量并確保所有洗滌步驟都完成;確保eBioscience ELISA洗液被用并稀釋正確。讓洗液在孔里至少停留15-30s。
ELISA試劑盒底物被污染: 底物溶液自身是沒有顏色的,確保底物在用之前沒有被金屬離子或氧化試劑污染。
ELISA試劑盒稀釋液被污染:大部分ELISA稀釋液是蛋白基質(zhì),*次打開后就有可能已經(jīng)被污染了,必須用無菌的移液管從瓶底移取使用。
ELISA試劑盒底物曝光:底物曝光可能會變藍(lán),解決辦法就是使用前保存在棕色瓶里。
ELISA試劑盒偶聯(lián)物稀釋有誤:確保偶聯(lián)物稀釋按照說明書的要求,偶聯(lián)物濃度太高有可能導(dǎo)致高背景。
胱抑素CElisa試劑盒孵育時間和溫度不對:孵育時間和溫度嚴(yán)格按照ELISA操作流程規(guī)定。
phospho-ERK1(Thr202/Thr204)+ERK2(Thr183/Tyr185) 受體2A抗體
phospho-ERK1(Thr202/Tyr204) 受體1抗體
phospho-ERK1/MAPK-1/2(Thr183/185) 受體1抗體
phospho-ESPL1 (Ser1073) 受體1抗體
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser104/106) 半γ合成酶抗體
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser118) 孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser167) 孤菲肽/痛敏肽抗體
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Ser305) 孤兒核受體抗體
Phospho-Estrogen Receptor alpha (Tyr537) 孤兒核受體蛋白Nur77抗體
Phospho-Ezrin (Thr567) 孤兒核受體PAR1抗體
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